细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
大鼠子宫内膜间质分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。子宫内膜即黏膜，由上皮（属单层柱状上皮，有分泌细胞和纤毛细胞二种）和固有膜（由结缔组织构成，其内有大量的星形细胞，称为基质细胞）组成，子宫内膜可分为浅表的功能膜和深部的基底层，功能层较厚，约占内膜厚度的4/5；基底层较薄较致密，约占1/5，功能层可剥脱，而基底层剥脱。子宫内膜构成雌性哺乳动物子宫壁的内层，位于子宫腔面，在动物生殖生理活动中占有重要地位。子宫和子宫内膜是维持雌性动物生理功能和生育能力的重要器官，子宫内膜的再生修复是子宫的重要生理功能。体外培养的子宫内膜间质细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。 方法简介：
实验室分离的大鼠子宫内膜间质采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的大鼠子宫内膜间质经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 大鼠子宫内膜间质细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 子宫 | 产品货号 | YS-01X7936 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：成纤维细胞样 传代特性：可传3代左右 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 大鼠子宫内膜间质体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠催乳素(PRL)试剂盒 ，英文名： PRL ELISA Kit Porcine tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) ELISA Kit 猪肿瘤坏死因子α(TNF-α)试剂盒 ELISA 小鼠血管抑素(mouse Angiostatin) 进口分装 CLIAKitforLNELISAKit大鼠层连蛋白/板层素 通用型DNA平滑末端连接克隆试剂盒(包括内切酶)10次 ELISAKitIFN-β/IFNB鸡β干扰素 血小板生成素 英文名称： Thromboietin 英文缩写： TPO 总蛋白S 英文名称： total protein S 英文缩写： TPS 坏死因子相关凋亡诱导配体 英文名称： tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 英文缩写： AIL/APO 2L 坏死因子相关凋亡诱导配体受体1 英文名称： tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 1 英文缩写： AIL R1 eIF4A3蛋白抗体 小鼠中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA 试剂盒 96T/48T Human ai ypsin (AT) ELISA Kit 人抗(AT)试剂盒 HumanglathioneS-ansferases,GSTpiELISAKit 人硫转移酶pi基因(GSTpi)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforABCG2(HumanATP-bindingcassetteanspoerG2)ELISAKit人腺苷三0酸结合盒转运体G2 伊红甲基蓝(EMB)革兰氏阴性细菌选择琼脂平板50个 Mouseniicoxidesyhase,NOSELISAKit小鼠合成酶(NOS)试剂盒规格：96T/48T 端粒酶反转录酶抗体 PRLR重组大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 Protein HCV-Core 丙型肝病毒-C区(多肽 1mgHCV-Core 丙型肝病毒-C区(多肽) CDK16重组人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 标签) Protein CCL1 Protein Human 重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 CD6 Protein Mouse 重组小鼠 CD6 / TP120 蛋白 大鼠子宫内膜间质细胞HCV-Core 丙型肝病毒-C区(多肽 1mgHCV-Core 丙型肝病毒-C区(多肽) CCL1 Protein Human 重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 PRLR重组大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 Protein CD6 Protein Mouse 重组小鼠 CD6 / TP120 蛋白 CDK16重组人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 标签) Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
|
