大鼠支气管平滑肌细胞

| 商品属性：

| 细胞介绍：

大鼠支气管平滑肌分离自支气管组织；支气管（Bronchi），是指由支气管分出的各级分枝，由支气管分出的一级支气管，即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较，前者较细长，走向倾斜；后者较粗短，走向较前者略直，所以经支气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和支气管还有以区别就是，支气管是以“C"型的支气管软骨为支架，而支气管不是。支气管平滑肌细胞主要功能：①支气管平滑肌细胞能维持支气管张力，保持支气管形态；②支气管平滑肌特异的超微结构特点和调节机制是支气管正常生理功能的基础；③支气管平滑肌通过分泌细胞因子和趋化因子等促炎介质，发挥免疫调节功能。支气管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

| 方法简介：

公司实验室分离的大鼠支气管平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

| 质量检测：

公司实验室分离的大鼠支气管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

| 培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

| 细胞培养操作：

1）复苏细胞：将含有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

| 注意事项：

1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件*。若由于培养条件不*而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7.该细胞仅供科研使用。

| 公司正在出售的产品

大鼠尾加压素2受体(S2R)试剂盒 ，英文名： S2R ELISA Kit

Mouse fibroblast growth factor 1 (aFGF-1) ELISA Kit 小鼠酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)试剂盒

MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 小鼠白介素2受体(IL-2R)试剂盒分装

CLIAKitforHSCCAg-2(umanSquamousCellCarcinomaAigen2)ELISAKit人鳞状上皮细胞癌抗原2

细胞NLK激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitβ-EP大鼠β内啡肽

(Cytochrome C)   作用：   ELISA   试剂盒   组装/原装

CXC 趋化因子受体 1(CXCR1)   作用：   ELISA   试剂盒   组装/原装

CXCR3(CXCR-3)   作用：   ELISA   试剂盒   组装/原装

人 CXCL-11(I-TAC)   作用：   ELISA   试剂盒   组装/原装

Mad2L1重组兔单克隆抗体

锌指蛋白774抗体

PTN重组小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白  Protein

催乳素诱导蛋白(PIP)重组蛋白 Recombinant Prolactin Induced Protein (PIP)

CD22重组人 Siglec-2 / CD22 蛋白 (aa 176-687, His 标签) Protein

FCGR3B Protein Human 重组人 CD16b / FCGR3B 蛋白

KLRK1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 NKG2D / KLRK1 蛋白 (aa 78-216, His 标签)

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.1mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(1-39) 促肾上腺皮质激素(1-39)(抗原)

FCGR3B Protein Human 重组人 CD16b / FCGR3B 蛋白

KIRREL3重组小鼠 KIRREL3 / NEPH2 蛋白 (His 标签) Protein

IL2RG Protein Rat 重组大鼠 IL2RG / CD132 蛋白

APOL1重组人 APOL1 / apolipoprotein L1 蛋白 (His 标签) Protein

大鼠支气管平滑肌细胞小鼠对基苯(PABA)ELISA 试剂盒

Human acidic fibroblast growth factor 1 (aFGF-1) ELISA Kit 人酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)试剂盒

Humanplatelet-associatedCompleme3,PAC3ELISAKit 人血小板相关补体3(PAC3)试剂盒分装

HumanAquaporin4,AQP-4试剂盒人水通道蛋白4(AQP-4)试剂盒

植物异柠檬酸脱氢酶(isociatedehydrogenase;IDH)电泳分析试剂盒5次

Humahyroxine，T4ELISAKit人甲状腺素(T4)试剂盒