细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
大鼠心脏微血管内皮分离自心脏组织；心脏是脊椎动物身体中重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力，把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开，故互不相通，心房与心室之间有瓣膜（房室瓣），这些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能。心脏微血管内皮细胞是组成心脏微血管腔面单层扁平上皮样细胞，它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在心脏血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。近年来大量研究表明，心肌微血管内皮细胞的功能和病理改变直接影响心肌细胞功能，也是诸多毒素、炎症因子及病毒等重要靶位，其作为体外研究的细胞模型在心肌缺血-再灌注发病机制和细胞间旁分泌细胞生长因子研究中起着重要作用。 方法简介：
公司实验室分离的大鼠心脏微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的大鼠心脏微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 大鼠心脏微血管内皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 心脏组织 | 产品货号 | YS-01X7428 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%） 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 内皮细胞样 传代特性 可传2-3代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠髓细胞触发受体1(EM1)试剂盒 ，英文名： EM1 ELISA Kit Mouse glycogen phosphorylase BB (GP-BB) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)试剂盒 ratprolactin,PRLELISAKit 大鼠催乳素(PRL)试剂盒分装 CLIAKitforHIV(Humanai-immunodeficiencyvirusaibody)ELISAKit人抗人类免疫缺陷病毒抗体 细胞PYK2激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次 ELISAKit5-HT大鼠5羟色胺 小鼠8异前列腺素试剂盒 小鼠8异前列腺素试剂盒 小鼠8异前列腺素试剂盒，，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠8异前列腺素试剂盒、小鼠8异前列腺素eisa试剂盒 小鼠8羟基脱氧鸟苷试剂盒 小鼠8羟基脱氧鸟苷试剂盒 小鼠8羟基脱氧鸟苷试剂盒，，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠8羟基脱氧鸟苷试剂盒、小鼠8羟基脱氧鸟苷eisa试剂盒 小鼠6前列腺素试剂盒 小鼠6前列腺素试剂盒 小鼠6前列腺素试剂盒，，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠6前列腺素试剂盒、小鼠6前列腺素eisa试剂盒 PE标记人CD45RO单克隆抗体 胰岛素受体β抗体 S100A9重组小鼠 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 (His 标签) Protein 次0酸核糖基转移酶1(HPRT1)重组蛋白 Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1) ALOX15B重组人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 Protein FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 标签) IFNAR1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (His 标签) ADAMTS7 peptide/HRP 辣根过氧化物酶标记整合素样金属蛋白酶与1型-7抗原 1mgADAMTS7 peptide/HRP 辣根过氧化物酶标记整合素样金属蛋白酶与1型-7抗原 FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 标签) FCGR2重组小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 标签), Biotinylated Protein CD14 Protein Rat 重组大鼠 CD14 蛋白 TFAP2C重组人 TFAP2C / AP2-GAMMA 蛋白 (His 标签) Protein 大鼠心脏微血管内皮细胞小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA 试剂盒 Human aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 人水通道蛋白2(AQP-2)试剂盒 Humancholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 人酯转移蛋白(CETP)试剂盒分装 Humanapelin13,AP13试剂盒人apelin13(AP13)试剂盒 植物氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(次氯酸离子)20次 Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit人总前列腺特异抗原(tPSA)试剂盒 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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