细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

大鼠小肠黏膜上皮分离自小肠组织；小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞，粘膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短，不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力，促使食物向下运动。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠小肠黏膜上皮采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠小肠黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

小鼠B6(VB6)ELISA 试剂盒

Rat bone morphogenetic protein 6 (BMP-6) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)试剂盒

HumanCCAAT/enhancerbindingproteinbeta,C/ELISAKit 人CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)试剂盒 进口分装

ChickenLipopolysaccharides,LPS试剂盒鸡脂多糖/内毒素(LPS)试剂盒

载玻片细胞MAPK蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit小鼠胃肠癌标志物CA199试剂盒

鱼类释放激素   ELISA. 

鱼类状腺原酸(T3)ELISAKit   ELISA. 

鱼类(Coisol)ELISAKit   ELISA. 

鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISAKit   ELISA.

GRHL3蛋白抗体

鱼免疫球蛋白M(IgM)试剂盒

Human collagen aoaibody (CLA) ELISA Kit 人抗胶原蛋白抗体(CLA)试剂盒

PorcineAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 猪血管生成素2(ANG-2)试剂盒 进口分装

CLIAKitforADRA1A(Mouseadrenergicalpha-1Areceptor)ELISAKit小鼠能a1A受体

血液乙醇脱氢酶IV活性比色法定量试剂盒20次

MouseSolubleClusterofdiffereiation30ligand,sCD30LELISAKit小鼠可溶性CD30配体(sCD30L)试剂盒

环指蛋白88抗体

EPOR重组人 EPOR / Erythropoietin Receptor 蛋白  Protein

软骨寡聚基质蛋白(COMP)重组蛋白 Recombinant Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP)

PRNP重组人 PRNP / Prion 蛋白  Protein

AACS Protein Human 重组人 AACS / Acetoacetyl-CoA Synthetase 蛋白 (His 标签)

HA Protein Influenza B 重组乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白

大鼠小肠黏膜上皮细胞软骨寡聚基质蛋白(COMP)重组蛋白 Recombinant Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP)

AACS Protein Human 重组人 AACS / Acetoacetyl-CoA Synthetase 蛋白 (His 标签)

EPOR重组人 EPOR / Erythropoietin Receptor 蛋白  Protein

HA Protein Influenza B 重组乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白

PRNP重组人 PRNP / Prion 蛋白  Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。