细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
大鼠外周血中性粒分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。白细胞是一类无色、球形、有核的血细胞。白细胞不是一个均一的细胞群，根据其形态、功能和来源部位可以分为三大类：粒细胞、单核细胞和淋巴细胞，其中粒细胞又可根据胞质中颗粒的染色性质不同，分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞三种。中性粒细胞是在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞质呈无色或极浅的淡红色，有许多弥散分布的细小的（0.2～0.4微米）浅红或浅紫色的颗粒。细胞核呈杆状或2～5分叶状，叶与叶间有细丝相连。中性粒细胞具趋化作用、吞噬作用和杀菌作用。中性粒细胞来源于骨髓，具有分叶形或杆状的核，胞浆内含有大量既不嗜碱也不嗜酸的中性细颗粒。这些颗粒多是溶酶体，内含髓过氧化酶、、碱性磷酸酶和酸性水解酶等丰富的酶类，与细胞的吞噬和消化功能有关。中性粒细胞在血液的非特异性免疫中起着十分重要的作用，它处于机体抵御微生物病原体，特别是在化脓性细菌入侵的线，具有很强的吞噬活性，可吞噬细菌、衰老的红细胞、抗原一抗体复合物和坏死的细胞等。中性粒细胞内含有大量溶酶体酶，因此能将吞噬入细胞内的细菌和组织碎片分解。当中性粒细胞吞噬数十个细菌后，自身发生解体，所释出的各种溶酶体酶类能溶解周围组织而形成脓液。中性粒细胞是人体内寿命短的细胞，一般体外培养12-24h内活性稳定，48h活性下降，96h基本死亡。 方法简介：
公司实验室分离的大鼠外周血中性粒采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的大鼠外周血中性粒经瑞氏染色法，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 大鼠外周血中性粒细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 外周血 | 产品货号 | YS-01X7564 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 圆形 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 悬浮 细胞形态 圆形 传代特性 不增殖；不传代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA 试剂盒 Kappa B subunit p65 factor - nucleus of rat affinity peptide (NF- kappa B p65) ELISA Kit 大鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)试剂盒 Humanserineprotease,PRSSELISAKit 人丝蛋白酶(PRSS)pcr检测试剂盒分装 ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1试剂盒鸡可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒规格：96T/48T 载玻片细胞PI-3KINASEP110BETA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次 MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit小鼠Ⅸ(FⅨ)试剂盒规格：96T/48T 腮腺病毒(MuV)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T 麻风杆菌(ML)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T 普氏立克次体(RP)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T 莫氏立克次体(RM)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T tinagl1抗体 着丝粒蛋白L抗体 NT5E重组大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 细胞调亡素/死亡受体5抗原 PRDX6重组人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein IL17RC Protein Human 重组人 IL17RC 蛋白 (Fc 标签) GHR Protein Mouse 重组小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 细胞调亡素/死亡受体5抗原 IL17RC Protein Human 重组人 IL17RC 蛋白 (Fc 标签) NT5E重组大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein GHR Protein Mouse 重组小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 PRDX6重组人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein 大鼠外周血中性粒细胞豚鼠免疫球蛋白A(IgA)试剂盒 ，英文名： IgA ELISA Kit Human hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 人低氧诱导因子1α(HIF-1α)试剂盒 Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 猴可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)pcr检测试剂盒分装 CLIAKitforBidELISAKit大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白 细菌柠檬酸利用试剂盒20次 rabbitLeptin,LEPELISAKit兔子瘦素(LEP)试剂盒规格：96T/48T 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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