细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

大鼠视网膜色素上皮分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。神经元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处多。层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力强。视网膜色素上皮（RPE）位于脉络膜和光感受器细胞外节之间，是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道；主要是由单层色素上皮细胞所构成，排列十分规则。视网膜色素上皮参与醇循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性，并分泌多种生长因子，帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。细胞呈多角形，细胞分为三部分，即顶部、体部和基底部。视网膜色素上皮细胞无再生能力，细胞死亡后不被替换，而是邻近的细胞向侧面滑动，以填补死亡细胞遗留下来的空间。视网膜色素上皮位于脉络膜和光感受器细胞外节之间，是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道。视网膜色素上皮参与醇循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性，并分泌多种生长因子，帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠视网膜色素上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠视网膜色素上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 试剂盒

Rat apoptosis related factor (FAS/CD95) ELISA Kit 大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)试剂盒

Human1,3-βDglucosidaseELISAKit 人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)试剂盒 进口分装

CLIAKitfor1,3-BetaD-Glu(Human1,3-BetaDglucosidase)ELISAKit人1,3-βD葡葡糖苷酶

饮料糖精(saccharin)含量比色法定量试剂盒20次

Mousekeyholelimpethemocyanin,KLHELISAKit小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)试剂盒

植物25羟基D3试剂盒   植物25羟基D3试剂盒   规格型号：96T/48T   植物25羟基D3试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：植物25羟基D3试剂盒、植物25羟基D3eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

鱼孕激素试剂盒   鱼孕激素试剂盒   规格型号：96T/48T   鱼孕激素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：鱼孕激素试剂盒、鱼孕激素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

鱼类状腺原酸试剂盒   鱼类状腺原酸试剂盒   规格型号：96T/48T   鱼类状腺原酸试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：鱼类状腺原酸试剂盒、鱼类状腺原酸eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

鱼类试剂盒   鱼类试剂盒   规格型号：96T/48T   鱼类试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：鱼类试剂盒、鱼类eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

乙醛酸还原酶抗体

植物D2(VD2)ELISA 试剂盒

Human ai liver cell membrane aibody (LMA) ELISA Kit 人抗肝细胞膜抗体(LMA)试剂盒

PorcineSomatostatin,SSELISAKit 猪(SS)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAFP(MouseAlpha-fetoprotein)ELISAKit小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白

血液纤维蛋白溶酶原激活剂抑制物(PAI)活性化学发光法定量试剂盒20次

Mousethrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit小鼠抗复合物(TAT)试剂盒

Rabbit Anti-Acetyl-Histone H3 (Lys56) antibody

HA重组甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/35820/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein

PERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase 0.5mgPERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase) 蛋白激酶R样内质网激酶抗原

CLEC4A重组人 CLEC4A / CLECSF6 / DCIR 蛋白 (His 标签) Protein

ADA Protein Human 重组人 ADA / Adenosine deaminase 蛋白 (His 标签)

C Protein Human 重组人 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (His 标签)

大鼠视网膜色素上皮细胞PERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase 0.5mgPERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase) 蛋白激酶R样内质网激酶抗原

ADA Protein Human 重组人 ADA / Adenosine deaminase 蛋白 (His 标签)

HA重组甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/35820/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein

C Protein Human 重组人 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (His 标签)

CLEC4A重组人 CLEC4A / CLECSF6 / DCIR 蛋白 (His 标签) Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。