细胞简介：

大鼠肾成纤维分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损以及骨创伤的修复有着十分重要的作用。肾成纤维细胞是肾脏结缔组织中重要的细胞类型，在体外培养中，一般大致成梭形、多角形或不规则形等，为贴壁生长型细胞。刚分离的肾成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。其主要功能有：①组成过滤屏障内壁的重要部分；②在炎症和致血栓物质的刺激合成必要的生物活性分子；③受损后影响系膜细胞和上皮细胞，进而影响肾脏病变。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠肾成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠肾成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA 试剂盒

Rat apolipoprotein B100 (apo-B100) ELISA Kit 大鼠载脂蛋白B100(apo-B100)试剂盒

Humanai-hepatitisDvirusaibody,ai-HDVELISAKit 人抗丁型肝病毒抗体(ai-HDV)试剂盒 进口分装

HumanHeatShockProtein60,HSP-60试剂盒人热休克蛋白60(Hsp-60)试剂盒

组织副氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定量PCR扩增试剂盒20次

HumanMaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAKit人基质金属蛋白酶3(MMP-3)试剂盒

植物激素脱落酸（ABA）ELISAKit   ELISA. 

植物K1(VK1)ELISAKit   ELISA. 

植物B12(VB12)ELISAKit   ELISA. 

植物A(VA)ELISAKit   ELISA.

白介素21受体抗体

植物纤维素酶(CE)试剂盒

Human ai calmodulin specific aibody (CAM-ab) ELISA Kit 人抗钙调素特异抗体(CAM-ab)试剂盒

Porcineendothelin1,ET-1ELISAKit 猪内皮素1(ET-1)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAFP-L3ELISAKit小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3

血液A含量比色法定量试剂盒20次

Mousethyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit小鼠抗促甲状腺素受体抗体(Ab)试剂盒

卵泡刺激素结合蛋白1抗体

ERBB3重组人 HER3 / ErbB3 蛋白  Protein

三叶因子1(TFF1)重组蛋白 Recombinant Trefoil Factor 1 (TFF1)

DHRS9重组人 DHRS9 蛋白 (His 标签) Protein

ADH7 Protein Human 重组人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 标签)

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白

大鼠肾成纤维细胞三叶因子1(TFF1)重组蛋白 Recombinant Trefoil Factor 1 (TFF1)

ADH7 Protein Human 重组人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 标签)

ERBB3重组人 HER3 / ErbB3 蛋白  Protein

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白

DHRS9重组人 DHRS9 蛋白 (His 标签) Protein