细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
大鼠软骨分离自软骨组织；软骨组织由软骨细胞、基质及纤维构成。软骨组织再生能力强，这些增生的幼稚细胞形似纤维母细胞，以后逐渐变为软骨母细胞，并形成软骨基质，细胞被埋在软骨陷窝内而变为静止的软骨细胞。根据软骨组织内所含纤维成分的不同，可将软骨分为透明软骨、弹性软骨和纤维软骨三种，其中以透明软骨的分布较广，结构也较典型。软骨细胞（chondrocyte）位于软骨陷窝内。幼稚的软骨细胞位于软骨组织的表层，单个分布，体积较小，呈椭圆形，长轴与软骨表面平行，越向深层的软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形，染色浅，细胞质弱嗜碱性，常见数量不一的脂滴。成熟的软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内，这些软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成，称为同源细胞群。电镜下，软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中，软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。 方法简介：
公司实验室分离的大鼠软骨采用胶原酶-联合消化制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的大鼠软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 大鼠软骨细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 软骨组织 | 产品货号 | YS-01X7305 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 梭形、多角形 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每3-4天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 梭形、多角形 传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
小鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA 试剂盒 Human urokinase type plasminogen activator (uPA/PLAU) ELISA Kit 人型纤溶酶原激活物(uPA/PLAU)试剂盒 HumanNuclearmaixprotein22,NMP-22ELISAKit 人核基质蛋白22(NMP-22)pcr检测试剂盒分装 guineapigmaixmetalloproteinase9,MMP-9试剂盒豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)试剂盒规格：96T/48T 真菌/酵母细胞浆可溶性总蛋白制备试剂盒20次 MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)试剂盒规格：96T/48T 人周期素依赖性激酶7(CDK-7)ELISAKit ELISA 人周期素依赖性激酶2(CDK-2)ELISAKit ELISA 人周期素依赖性激酶1(CDK-1)ELISAKit ELISA 人0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit ELISA 阿尔茨海默病淀粉样蛋白相关胶原蛋白抗体 重组膜粘连蛋白5抗体 IL18R1重组小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 标签) Protein C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一种原癌基因)抗原 CSF2重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein IL36B Protein Human 重组人 IL36B / IL1F8 蛋白 FSTL3 Protein Mouse 重组小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白 C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一种原癌基因)抗原 IL36B Protein Human 重组人 IL36B / IL1F8 蛋白 IL18R1重组小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 标签) Protein FSTL3 Protein Mouse 重组小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白 CSF2重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein 大鼠软骨细胞豚鼠胆囊收缩素/肠促肽(CCK)试剂盒 ，英文名： CCK ELISA Kit Human dopamine D2 receptor (D2R) ELISA Kit 人多巴胺D2受体(D2R)试剂盒 Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 兔子酯转移蛋白(CETP)pcr检测试剂盒分装 CLIAKitforBeta-TG(RabbitBeta-Thromboglobulin)ELISAKit兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白 细菌铜ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量试剂盒20次 rabbitInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit兔子胰岛素样生长因子1(IGF-1)试剂盒规格：96T/48T 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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