
大鼠浦肯野细胞
| 商品属性: 组织来源 | 小脑组织 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 产品货号 | YS-01X7739 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 神经元细胞样 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
| 细胞介绍: 大鼠浦肯野分离自小脑皮质组织;小脑的表面被覆着一层灰质,叫小脑皮质,小脑皮质分为3层,从表及里分别为分子层、浦肯野细胞层和颗粒细胞层。皮质里含有星状细胞、篮状细胞、浦肯野细胞、高尔基细胞和颗粒细胞等5种神经元。浦肯野细胞发出的轴突组成小脑皮质的传出纤维,终止于小脑白质内的神经核。浦肯野细胞(Purkinje cell)是从小脑皮质发出的能够传出冲动的神经元。人的小脑皮质约有1500万个浦肯野细胞。浦肯野细胞还广泛分布于心室。显著的电生理特点是传导性强,传导速度快,可达4000mm/s。属快反应自律型细胞,具有舒张期自动除极化的性能,因而有自律性,但自律性强度明显低于窦房结P细胞。这类细胞常常平行排列,细胞内电阻低,只有心室细胞的1/3。小脑:浦肯野细胞是小脑皮质中大的神经元,细胞体呈梨形,顶端发出2~3条粗大的主树突,向外伸入分子层。主树突沿途分支繁茂,形如展开的、扁薄的扇形,铺展在与小脑叶片长轴垂直的平面上。树突分支上有大量的树突棘,与传入纤维构成广泛的突触联系,接受传入小脑的全部信息。轴突由细胞底部(与主树突相对方向)发出,细长,离开胞体不远便形成有髓神经纤维,向内经颗粒层离开皮质进入白质,组成小脑皮质的传出纤维,终止于小脑内部的神经核团。一个浦肯野细胞的轴突约形成500个终末膨大,约与小脑深部核团的35个神经元形成突触。心脏浦肯野细胞常常平行排列,几个细胞互相以浆膜连接排成一个小束,小束外包绕着基底膜。细胞内含肌原纤维很少,胞浆区内充满糖原颗粒、线粒体和肌浆网,细胞内电阻低,只有心室细胞的1/3。浦肯野细胞内无横管系统,但膜电容比收缩细胞大,可能是由于其闰盘结构广泛而复杂,提供了较大的表面积的缘故。浦肯野细胞闰盘的主要成分是缝隙连接,粒着膜占的比例很少,这些可能是构成浦肯野细胞传导快的形态学基础。 | 方法简介: 公司实验室分离的大鼠浦肯野采用消化法结合神经元专用培养基、化学试剂抑制法筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶 | 质量检测: 公司实验室分离的大鼠浦肯野经Neph3免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 | 培养信息: 包被条件 PLL(0.1mg/ml) 培养基 含脂质浓缩液、BSA、Monothioglycerol、Transferrin、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 神经元细胞样 传代特性 不增殖;不传代 消化液 0.25% 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% | 细胞培养操作:
1)复苏细胞:将含有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 | 注意事项:
1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件*。若由于培养条件不*而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 | 公司正在出售的产品
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