大鼠胚胎成纤维细胞

| 商品属性：

| 细胞介绍：

大鼠胚胎成纤维分离自胚胎；成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚胎成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞常用作ES细胞培养常用的饲养层细胞，能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES细胞增殖的因子，故能有效地促进ES细胞的增殖并维持其未分化特性和多潜能性，且分泌效果优于外源添加的一些因子，而且可以为ES细胞的培养提供类似于体内的微环境，故在研究哺乳动物ES细胞中得到广泛使用。

| 方法简介：

公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

| 质量检测：

公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

| 培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

| 细胞培养操作：

1）复苏细胞：将含有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

| 注意事项：

1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件*。若由于培养条件不*而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7.该细胞仅供科研使用。

| 公司正在出售的产品

小鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA 试剂盒

Rat ai cardiolipin aibody IgG (ACA-IgG) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗体IgG(ACA-IgG)试剂盒

HumanovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit 人卵清蛋白特异性IgE(OVAsIgE)试剂盒 进口分装

Humanai-BullousPemphigoid180aibody,BP180-Ab试剂盒人抗BP180抗体(BP180-Ab)试剂盒

植物核糖体分离试剂盒10次

Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)试剂盒

质粒大量提取试剂盒（非柱式法）   5T

QSPlasmidMaxiKit   10T

血液(溶液型）   10ml（血量）

Relax-ISOBloodDNAKitI   50ml（血量）

AF680标记的腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体

猪α干扰素(IFN-α)ELISA 试剂盒

Human ai murine typhus aibody (ai-typhus-Ab) ELISA Kit 人抗斑疹伤寒抗体(ai-typhus-Ab)试剂盒

Porcineierleukin8,IL-8ELISAKit 猪白介素8(IL-8/CXCL8)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAgIa(HumanangiotensinIIreceptoypeIa)ELISAKit人血管紧张素Ⅱ受体Ⅰa型

血液牛病毒性腹泻病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定性试剂盒20次

MouseypsinELISAKit小鼠(ypsin)试剂盒

二酰基甘油酰基转移酶2样蛋白3抗体

VCAM1重组人 VCAM-1 / CD106 蛋白 (His 标签) Protein

雄激素受体(AR)重组蛋白 Recombinant Androgen Receptor (AR)

IL23重组人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白 (His 标签) Protein

AGT Protein Human 重组人 Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 蛋白 (His 标签)

Spike Protein MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 367-606, Fc 标签)

大鼠胚胎成纤维细胞雄激素受体(AR)重组蛋白 Recombinant Androgen Receptor (AR)

AGT Protein Human 重组人 Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 蛋白 (His 标签)

VCAM1重组人 VCAM-1 / CD106 蛋白 (His 标签) Protein

Spike Protein MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 367-606, Fc 标签)

IL23重组人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白 (His 标签) Protein