细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

大鼠膀胱上皮分离自膀胱组织；膀胱是一个储尿器官，在哺乳类动物，它是由平滑肌组成的一个囊形结构，位于骨盆内，其后端开口与尿道相通。膀胱与尿道的交界处有括约肌，可以控制尿液的排出。膀胱壁由三层组织组成，由内向外为黏膜层、肌层和外膜。肌层由平滑肌纤维构成，称为逼尿肌，逼尿肌收缩，可使膀胱内压升高，压迫尿液由尿道排出。在膀胱与尿道交界处有较厚的环形肌，形成尿道内括约肌。在括约肌收缩能关闭尿道内口，防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分为三层：即浆膜层（蜂窝脂肪组织）、肌肉层（逼尿肌、膀胱三角区肌）和黏膜层（极薄的一层移行上皮组织）。其主要作用有：①组成过滤屏障内壁的重要部分；②在炎症和致血栓物质的刺激合成必要的生物活性分子；③受损后影响系膜细胞和上皮细胞，进而影响肾脏病变。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠膀胱移行上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠膀胱移行上皮经Cytokeratin-AE1/AE3免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

小鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA 试剂盒

Rat ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)试剂盒

Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISAKit 人糖化蛋白(GSP)试剂盒 进口分装

HumanAlpha-fetoprotein,AFP试剂盒人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)试剂盒

植物半胱(cysteine)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次

Monkeyβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)试剂盒

致病性大肠杆菌(EPEC)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

单增李斯特菌(LM)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

球菌(SA)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

甲型副氏菌(SPA)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

20号染色体开放阅读框196抗体

猪β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA 试剂盒

Human ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 人抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)试剂盒

Porcineierleukin3,IL-3ELISAKit 猪白介素3(IL-3)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAhCGAb(Humanai-chorionicgonadoopin-aibody)ELISAKit人抗人绒毛膜抗体

血液牛病毒性腹泻病毒II型(BovineViralDiarrhoeaVirus-2;BVDV-2)定量PCR扩增试剂盒20次

MouseTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit小鼠坏死因子α(TNF-α)试剂盒

蛋白激酶C结合蛋白NELL2抗体

IFNAR1重组食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein

IL-5 peptide 白细胞介素5抗原 0.5mgIL-5 peptide 白细胞介素5抗原

CNTF重组人 CNTF 蛋白 (His 标签) Protein

AIF1 Protein Human 重组人 IBA1 / AIF1 蛋白 (His 标签)

DDR1 Protein Mouse 重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白

大鼠膀胱移行上皮细胞IL-5 peptide 白细胞介素5抗原 0.5mgIL-5 peptide 白细胞介素5抗原

AIF1 Protein Human 重组人 IBA1 / AIF1 蛋白 (His 标签)

IFNAR1重组食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein

DDR1 Protein Mouse 重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白

CNTF重组人 CNTF 蛋白 (His 标签) Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。