细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

大鼠颞下颌关节软骨分离自颞下颌关节软骨组织，颞下颌关节又称颞颌关节"或下颌关节"。由下颌头与颞骨下颌窝和关节结节组成，左右合成一联合关节，主理张口闭口和咀嚼运动。关节囊松弛，侧方为内、外侧韧带所加强。囊内的关节盘呈卵圆形，由纤维软骨组成，区分为前、中、后三部分。上面呈鞍状，前凹后凸，与关节结节和下颌窝的凸凹轮廓相对应；下面凹正对下颌头，周缘与关节囊相接，前缘与穿过关节囊的翼外肌腱相连。关节盘将关节腔分成上、下两半。关节外更有蝶下颌韧带(蝶棘至下颌小舌)和茎突下颌韧带(茎突至下颌角)予以加固。关节软骨属于透明软骨，表面光滑、呈淡蓝色、有光泽，它是由一种特殊的叫做致密结缔组织的胶原纤维构成的基本框架，这种框架呈半环形，类似拱形球门，其底端紧紧附着在下面的骨质上，上端朝向关节面，这种结构使关节软骨紧紧与骨结合起来而不会掉下来，同时当受到压力时候，还可以有少许的变形，起到缓冲压力的作用。在这些纤维之间，散在分布着软骨细胞，软骨细胞由浅层向深层逐渐由扁平样至椭圆或圆形的细胞组成，这些软骨细胞维持关节软骨的正常代谢。关节软骨没有神经支配，也没有血管，其营养成分必须从关节液中取得，而其代谢废物也必须排至关节液中，关节软骨的这种营养代谢必须通过关节运动，使关节软骨不断的受到压力刺激才行，所以关节运动对于维持关节软骨的正常结构起重要的作用。关节软骨细胞位于关节软骨陷窝内。幼稚的关节软骨细胞位于关节软骨组织的表层，单个分布、体积较小、呈椭圆形，长轴与关节软骨表面平行，越向深层的关节软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形、染色浅，细胞质弱嗜碱性，常见数量不一的脂滴。成熟的关节软骨细胞多2-8个成群分布于关节软骨陷窝内，这些关节软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成，称为同源细胞群。电镜下，关节软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中，关节软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的关节软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠颞下颌关节软骨采用胶原酶联合消化制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠颞下颌关节软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每3-4天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA 试剂盒

Rat angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)试剂盒

humansinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit 人抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)试剂盒 进口分装

HumanCyclin-dependekinase7,CDK-7试剂盒人周期素依赖性激酶7(CDK-7)试剂盒

组织GSK3α激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)试剂盒

中文名称   方法   规格

大鼠固(ALD)ELISAKit   ELISA. 

大鼠去甲上腺素(NA)ELISAKit   ELISA. 

大鼠前列腺素F(PGF)ELISAKit   ELISA.

KLHDC8B蛋白抗体

猪白介素12(IL-12)试剂盒

Human ai Sp100 aibody (Sp100) ELISA Kit 人抗sp100抗体(sp100)试剂盒

PorcineIerleukin18,IL-18ELISAKit 猪白介素18(IL-18)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAIF(Humanapoptosisinducingfactor)ELISAKit人凋亡诱导因子

血液/活化II(THROMBIN/FACTORIIa)活性荧光定量试剂盒20次

MouseUbiquitin,UbELISAKit小鼠泛素蛋白(Ub)试剂盒

钾通道四聚体结构域蛋白11抗体

CD274重组大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His 标签) Protein

CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1 0.5mgCREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 环腺苷酸应答元件结合蛋白(抗原)

CSF3R重组人 G-CSFR / CD114 蛋白 (His 标签) Protein

AK1 Protein Human 重组人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 (His 标签)

NTRK3 Protein Mouse 重组小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 (His 标签)

大鼠颞下颌关节软骨细胞CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1 0.5mgCREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 环腺苷酸应答元件结合蛋白(抗原)

AK1 Protein Human 重组人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 (His 标签)

CD274重组大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His 标签) Protein

NTRK3 Protein Mouse 重组小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 (His 标签)

CSF3R重组人 G-CSFR / CD114 蛋白 (His 标签) Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。