细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

大鼠脑动脉血管内皮分离自脑动脉组织；脑动脉有成对的颈内动脉和椎动脉互相衔接成动脉循环；静脉系多不与同名动脉拌行，所收集的静脉血先进入静脉窦再汇入颈内静脉；各级静脉都没有瓣膜，它包括脑的动脉系统和脑的静脉系统。脑动脉血管内皮细胞主要功能：①维持血管内外的动态平衡；②合成和分泌细胞因子和介质；③维持凝血和纤溶的动态平衡。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠脑动脉血管内皮采用胶原酶-混合消化法并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠脑动脉血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA 试剂盒

Rat androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 大鼠雄(ASD)试剂盒

Humanβ2-Glycoprotein1aibodyIgA,β2-GP1AbIgAELISAKit 人β2糖蛋白1抗体IgA(β2-GP1AbIgA)试剂盒 进口分装

HumanCXC-chemokinereceptor1,CXCR1试剂盒人CXC趋化因子受体1(CXCR1)试剂盒

组织ERK2激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanprocollagenⅢN-terminalpeptide，PⅢELISAKit人Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)试剂盒

中文名称   方法   规格

人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISAKit   ELISA. 

人胰岛素原(PI)ELISAKit   ELISA. 

人胰岛素受体β(ISR-β)ELISAKit   ELISA.

HRAS1抗体

猪白介素6(IL-6)ELISA 试剂盒

Human ai EB virus aibody (EBV) ELISA Kit 人抗EB病毒抗体(EBV)试剂盒

Porcineplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit 猪纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)试剂盒 进口分装

CLIAKitforALDELISAKit大鼠固同

血液逆转录酶(REVERSEANSCREPTASE)活性荧光定量试剂盒20次

MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒

激活素受体相互作用蛋白1抗体

DPP7重组人 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 标签) Protein

趋化因子C-C-基元受体3(CCR3)重组蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 3 (CCR3)

MSLN重组人 MSLN / Mesothelin 蛋白 , Biotinylated Protein

AKT1 Protein Human 重组人 AKT1 / PKB / PKBα 蛋白 (His 标签)

HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

大鼠脑动脉血管内皮细胞趋化因子C-C-基元受体3(CCR3)重组蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 3 (CCR3)

AKT1 Protein Human 重组人 AKT1 / PKB / PKBα 蛋白 (His 标签)

DPP7重组人 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 标签) Protein

HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

MSLN重组人 MSLN / Mesothelin 蛋白 , Biotinylated Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。