细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

大鼠脉络膜微血管内皮分离自眼球脉络膜组织；脉络膜在视网膜和巩膜之间，含有丰富血管和色素细胞，对外力冲击的耐受性较视网膜差，当眼球受到从前面来的外力的冲击作用通过玻璃体传到后极部时，坚硬的巩膜在其外面又有抵抗作用，使脉络膜在内外两种作用夹攻下而发生破裂和出血。脉络膜呈暗褐色，围绕视神经乳头部有照膜，为青绿色带金属光泽的三角形区。脉络膜是眼球中膜的后2/3处的薄膜，由纤维组织、小血管和毛细血管组成，软而薄，棕红色，在巩膜和视网膜之间，续连于睫状体后方。脉络膜的血循环营养视网膜外层，其含有的丰富色素起遮光暗房作用。主要功能是营养视网膜外层及玻璃体，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同时对视觉系统起保护作用，对整个视觉神经有调节作用。续连于睫状体后方，含丰富的血管和色素细胞，有营养和遮光作用。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠脉络膜微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠脉络膜微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

小鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA 试剂盒

Rat alternative macrophage activation associated chemical factor 1 (AmAC-1) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)试剂盒

Humanai-matedciullinatedvimeinaibody,MCVELISAKit 人抗突变型瓜波形蛋白抗体(MCV)试剂盒 进口分装

HumanAlanineAminoansferase,ALT/GPT试剂盒人转氨酶/谷转氨酶(ALT/GPT)试剂盒

植物O-糖基糖蛋白化试剂盒5次

Mouse8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit小鼠8异前列腺素(8-iso-PG)试剂盒

中文名称   方法   规格

小鼠25羟基D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISAKit   ELISA. 

小鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISAKit   ELISA. 

小鼠C(VC)ELISAKit   ELISA.

17号染色体开放阅读框75抗体

猪补体蛋白3(C3)ELISA 试剂盒

Human Legionella aigen (LP Ag) ELISA Kit 人军团菌抗原(LP Ag)试剂盒

PorcinecardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit 猪心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)试剂盒 进口分装

CLIAKitforALG(Humanai-lymphocyteglobulin)ELISAKit人抗淋巴细胞球蛋白

血液卵0脂乙酰转移酶(LCAT)活性荧光定量试剂盒20次

MouseVitaminC,VCELISAKit小鼠C(VC)试剂盒

大脑边缘系统相关膜蛋白抗体

CNTN3重组人 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (708 Asp/Asn, His 标签) Protein

卵泡抑素(FS)重组蛋白 Recombinant Follistatin (FS)

SBDS重组人 SBDS / Shwachman-Bodian-Diamond syndrome 蛋白 (His 标签) Protein

ALDH1A1 Protein Human 重组人 ALDH1 / ALDH1A1 / ALDC 蛋白 (His 标签)

HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

大鼠脉络膜微血管内皮细胞卵泡抑素(FS)重组蛋白 Recombinant Follistatin (FS)

ALDH1A1 Protein Human 重组人 ALDH1 / ALDH1A1 / ALDC 蛋白 (His 标签)

CNTN3重组人 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (708 Asp/Asn, His 标签) Protein

HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

SBDS重组人 SBDS / Shwachman-Bodian-Diamond syndrome 蛋白 (His 标签) Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。