
大鼠冠状动脉成纤维细胞 | 商品属性: 组织来源 | 冠状动脉 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 产品货号 | YS-01X7748 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
| 细胞介绍: 大鼠冠状动脉成纤维分离自冠状动脉组织;冠状动脉是供给心脏血液的动脉,起于主动脉根部,分左右两支,行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则,将冠状动脉的分布分为三型:右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的对分支。左冠状动脉为一短干,发自左主动脉窦,经肺动脉起始部和左心耳之间,沿冠状沟向左前方行后,立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行,旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。它是构成冠状动脉壁的主要细胞成分,细胞膜上分布着多种离子通道,如电压依赖性Na+通道、多种Ca2+通道和K+通道;它们参与了静息电位的维持与细胞膜电位的复极化、超极化,调节血管平滑肌的收缩及舒张功能,此外动脉粥样硬化的发展也涉及冠状动脉平滑肌细胞增殖、炎症及凋亡等。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。 | 方法简介: 公司实验室分离的大鼠冠状动脉成纤维采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 | 质量检测: 公司实验室分离的大鼠冠状动脉成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 | 培养信息: 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传2-3代左右;2代以内状态佳 消化液 0.25% 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% | 细胞培养操作:
1)复苏细胞:将含有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 | 注意事项:
1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件*。若由于培养条件不*而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 | 公司正在出售的产品
大鼠γ干扰素(IFNγ)试剂盒 ,英文名: IFNγ ELISA Kit Rabbit soluble P selectin (sP-s 兔子可溶性P选择素(sP-s ELISA 小鼠巨嗜细胞性蛋白-1a(mouse MIP-1a/CCL3) 进口分装 CLIAKitforIL-18ElisaKit大鼠白介素18 通用型鲤鱼春季病毒血症(SpringViraemiaofCarp;SVC)试剂盒20次 ELISAKitHO-2大鼠血红素氧合酶2 猪可溶性E选择素(sE-selectin)ELISAKit ELISA. 猪白介素13(IL-13)ELISAKit ELISA. 猪转化生长因子β2(TGF-β2)ELISAKit ELISA. 猪E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISAkit ELISA. PAPLN蛋白多糖样硫酸化糖蛋白抗体 猪流行性腹泻病毒抗体(PEDV)试剂盒 Human basic fibroblast growth factor (bFGF) ELISA Kit 人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)试剂盒 PorcineMethemoglobin,MHBELISAKit 猪高铁血红蛋白(MHB)试剂盒 进口分装 CLIAKitforAmAC-1(HumanAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1)ELISAKit人巨噬细胞替代激活相关化学因子1 血液果糖-1,6-二0酸缩酶(ALD)定量试剂盒20次 PorcineActivinA,ACV-AELISAKit猪活化素A(ACV-A)试剂盒 同源盒基因HOXA3蛋白抗体 TNFRSF1B重组小鼠 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 Protein ATM(ataxia telangiectasia mutated 0.5mgATM(ataxia telangiectasia mutated) 毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗原 TPO重组人 Thyroid peroxidase / TPO 蛋白 (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr, His 标签) Protein APP Protein Human 重组人 Beta-amyloid 40 / Beta-APP40 蛋白 (His & GST 标签) CD40 Protein Rat 重组大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His 标签) 大鼠冠状动脉成纤维细胞ATM(ataxia telangiectasia mutated 0.5mgATM(ataxia telangiectasia mutated) 毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗原 APP Protein Human 重组人 Beta-amyloid 40 / Beta-APP40 蛋白 (His & GST 标签) TNFRSF1B重组小鼠 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 Protein CD40 Protein Rat 重组大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His 标签) TPO重组人 Thyroid peroxidase / TPO 蛋白 (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr, His 标签) Protein
|