细胞简介：

大鼠肝窦内皮细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。肝窦内皮细胞（SEC）是肝脏内所占比例高的非实质细胞，位于肝窦腔与肝细胞之间，具有物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于拥有一般细胞所没有的窗孔结构、细胞间连结松散、内皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性，从而达到快速交换各种大小分子的目的。肝在遭到多种病原侵袭时，肝窦内皮细胞窗孔逐渐减少或消失，内皮下基膜形成，产生类似于连续型毛细血管的结构，这一过程称为肝窦毛细血管化。它由多种因素引起，其过程极复杂，在多种肝病的发病前期阶段均有出现，近年来受到广泛关注。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠肝窦内皮采用混合酶灌流消化、反复低速离心、密度梯度离心法，并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠肝窦内皮经CD31、CD14免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

大鼠环0腺苷(cAMP)试剂盒 ，英文名： cAMP ELISA Kit

Rabbit maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 兔基质金属蛋白酶1(MMP-1)试剂盒

脑膜奈瑟菌W135群(NM- W135)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMouseLactateDehydrogenase,LDHELISAKit小鼠乳酸脱氢酶

体液过氧化氢(HYDROGENPEROXIDE)活性荧光定量试剂盒20次

ELISAKit2,3-dinor-TXB2人2,3Dinor血栓烷B2

猪血管生成素2(ANG-2)试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪血管生成素1(ANG-1)试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪血管内皮细胞生长因子A（VEGF-A）试剂盒     试剂盒   组装/原装

G蛋白信号转导调节因子8抗体

猪细胞色素氧化酶(CC0)试剂盒

Human maix metalloproteinase 3 (MMP-3) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶3(MMP-3)试剂盒

RabbitBcl-2AssaciatedXprotein,BAXELISAKit 兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)试剂盒 进口分装

CLIAKitforai-CMVIgG(Humanai-cytomegalovirusIgGaibody,ai-CMVIgG)ELISAKit人抗巨细胞病毒抗体IgG

血液α-活性CNPG3比色法定量试剂盒50次

PorcineHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit猪热休克蛋白20(HSP-20)试剂盒

微管蛋白聚合促进蛋白24

VTN重组小鼠 Vitronectin / VTN 蛋白 (His 标签) Protein

Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein 0.5mgAg-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein) ARC(多肽抗原)

TLR4重组人 TLR4 / CD284 蛋白 (His 标签) Protein

BCL2L2 Protein Human 重组人 BCL-W / BCL2L2 蛋白 (His 标签)

ERBB3 Protein Rat 重组大鼠 HER3 / ErbB3 蛋白

大鼠肝窦内皮细胞Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein 0.5mgAg-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein) ARC(多肽抗原)

BCL2L2 Protein Human 重组人 BCL-W / BCL2L2 蛋白 (His 标签)

VTN重组小鼠 Vitronectin / VTN 蛋白 (His 标签) Protein

ERBB3 Protein Rat 重组大鼠 HER3 / ErbB3 蛋白

TLR4重组人 TLR4 / CD284 蛋白 (His 标签) Protein