细胞简介：

大鼠表皮成纤维分离自皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠表皮成纤维采用先消化、后-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠表皮成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

小鼠内毒素(ET)ELISA 试剂盒

P Nixonn Ron (Prednisolone) ELISA Kit 人龙(Prednisolone)试剂盒

Human26Sproteasome,26SPSMELISAKit 人26S蛋白酶体(26SPSM)pcr检测试剂盒分装

HumanAbnormalprothrombin,APT试剂盒人异常原(APT)试剂盒规格：96T/48T

正常女性人体肝组织微粒体组分(5毫克/毫升)500微升

Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISAKit小鼠抗利尿激素/血管加压素/精加压素(ADH/VP/AVP)试剂盒规格：96T/48T

小鼠细胞凋亡因子 (mouse Fas)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D

小鼠细胞凋亡因子配体 (mouse Fas-Ligand)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D

mouse Flt3 Ligand   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D

小鼠粒细胞集落刺激因子 (mouse G-CSF)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D

补体因子H相关蛋白4抗体

自然杀伤激活受体相关蛋白DAP12重组兔单克隆

EGFR重组小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (Fc 标签) Protein

半乳糖凝集素9(GAL9)重组蛋白 Recombinant Galectin 9 (GAL9)

LYZL2重组人 Lysozyme 2 / LYZL2 蛋白 Protein

CDON Protein Human 重组人 CDON / CDO 蛋白

IL2RA Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL2RA 蛋白

Alpha-Synuclein 核突触蛋白(抗原 0.5mgAlpha-Synuclein 核突触蛋白(抗原)

CDON Protein Human 重组人 CDON / CDO 蛋白

LYPD3重组小鼠 C4.4A / LYPD3 蛋白 Protein

ENPEP Protein Rat 重组大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (aa 41-945, His 标签)

NLK重组人 nemo-like kinase / NLK 蛋白 (His & GST 标签) Protein

大鼠表皮成纤维细胞小鼠B6(VB6)ELISA pcr检测试剂盒

Rat bone morphogenetic protein 6 (BMP-6) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)试剂盒

HumanCCAAT/enhancerbindingproteinbeta,C/EBPβELISAKit 人CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)pcr检测试剂盒分装

ChickenLipopolysaccharides,LPS试剂盒鸡脂多糖/内毒素(LPS)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞MAPK蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit小鼠胃肠癌标志物CA199试剂盒规格：96T/48T