牛副结核ELISA试剂诊断方法介绍

牛副结核ELISA试剂诊断方法介绍

    牛副结核病是由甬0结核分枝杆菌引起的一种以反刍兽为主的慢性传染病，又叫johne病。该方法的敏感性76％，特异性97％,通过对2483头奶牛进行检测，检出率为6.1％，并与常规的补反和反常反应进行了比较。“前对该病尚无有效的治疗办法，*此病的*办法是检出、隔离或淘汰病畜，目前本病的检疫主要依赖补反和反常反应。

一、材料与试剂

1、副结核分枝杆菌亲和层析抗原

2、草分枝杆菌吸收抗原

3、兔抗牛IgG酶标抗体

4、牛副结核病参考阳性血清

5、牛副结核病参考阴性血清

1～5项均由单位供应。

6、器材 ELISA板，酶联免疫吸附检测仪、加样器、洗瓶、恒温箱等。

7、试剂及溶液配制同第五节猪瘟ELISA.。

二、操作方法

1、抗原包被以抗原稀释液将副结核亲和层析抗原稀释至50μg/ml,每孔包被0.1ml.部分对照孔以牛血清白蛋白(50μg/ml)包被。

2、血清处理 取待检血清、参考阳性血清、参考阴性血清各0.10ml，加生理盐水0.80ml，加草分枝杆菌吸收抗原0.10ml，混匀，37℃感作1h.取0.10ml，加血清稀释液0.90ml(注意血清稀释液中加牛血清白蛋白，不加犊牛血清)。混匀即可

3、正式试验 按表12－4进行。每个样品加2孔，以求OD平均值。

三、结果判定

牛副结核在对照组成立的前提下， 即参考阳性血清呈棕黄色，参考阴性血清及其它对照孔呈无色或浅黄色， 判定待测结果。

1、目测判定 与参考阳性血清孔颜色相当，即呈棕黄色，判为ELISA阳性(＋)。

2、酶标仪判定(490nm) 以底物溶液对照孔调零，校正参考阳性血清OD值为1.0(或相应规定值)，测定待检孔。当OD≥0.50，判ELISA阳性(＋)；0.40≤OD≤0.49判ELISA可凝(±)；OD<0.40，判ELISA阴性(－)。

YSRIBIO4312    类人猿免疫球蛋白G4(IgG4)ELISA Kit    ，英文名：    Simian Immunoglobulin G4,IgG4 ELISA Kit    ，规格：    48T/96T
YSRIBIO4313    类人猿巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA Kit    ，英文名：    Simian Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA Kit    ，规格：    48T/96T
YSRIBIO4314    类人猿降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA Kit    ，英文名：    Simian calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit    ，规格：    48T/96T
YSRIBIO4315    类人猿降钙素(CT)ELISA Kit    ，英文名：    Simian Calcitonin,CT ELISA Kit    ，规格：    48T/96T
YSRIBIO4316    类人猿黄体生成素(LH)ELISA Kit    ，英文名：    Simian Luteinizing Hormone,LH ELISA Kit    ，规格：    48T/96T
YSRIBIO4317    类人猿骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA Kit    ，英文名：    Simian Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit    ，规格：    48T/96T
YSRIBIO4319    蝌蚪睾酮(T)ELISA Kit    ，英文名：    Tadpole Testosterone,T ELISA kit    ，规格：    48T/96T
YSRIBIO4320    蝌蚪雌二醇(E2)ELISA Kit    ，英文名：    Tadpole Estradiol,E2 ELISA kit    ，规格：    48T/96T