获取小鼠神经元细胞主要有两种方法：传统酶解法和试剂盒提取法，今天小编帮你梳理关键步骤和注意事项： 一、传统酶解法（适合基础研究） 取材与消毒 选E17.5天孕鼠或出生后5-7天小鼠，酒精消毒后取脑。 显微镜下分离目标区域（如皮层、海马），避免混入其他细胞。 消化与过滤 用木瓜蛋白酶消化10-20分钟，终止后过滤去除杂质。 离心后重悬细胞，用台盼蓝染色计数。 接种与培养 按密度接种（如六孔板1.0-1.2×10⁶个/孔），4小时后换神经元专用培养基。 每3天换液，保持细胞活性。 二、试剂盒提取法（适合高纯度需求） 适用场景：需快速获得高纯度（>90%）原代细胞。 操作要点： 用1-2日龄小鼠（KM、C57等品系）。 按试剂盒说明配制酶溶液，组织经分离、消化、铺板纯化48小时后可获得细胞。 1 Test可获得T25培养瓶细胞数>1×10⁶。 三、关键细节 无菌操作：提前紫外线消毒超净台，全程酒精消毒。 消化时间：皮层/海马神经元10-20分钟，过长易损伤细胞。 培养基：神经元专用培养基（如Neurobasal）效果更佳。
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