判断抗体是否失活,核心看它能不能有效结合抗原或发挥中和作用。常用的方法是中和试验和ELISA检测,一个直接测功能,一个定量看结合能力。 一、中和试验:测功能活性 病毒中和试验:把抗体和病毒混合后感染细胞,如果细胞存活率高,说明抗体中和了病毒,活性正常。 毒素中和试验:比如抗“O"试验,抗体和毒素混合后加红细胞,如果红细胞不溶解,说明抗体中和了毒素,活性没问题。 二、ELISA检测:定量结合能力 原理:抗体吸附在固相载体上,加入待测抗体后,通过酶标记二抗显色,显色程度和抗体量相关。 步骤: 抗原包被:把抗原固定在微孔板中。 加入待测抗体:和抗原结合。 加入酶标二抗:和抗体结合。 显色反应:加底物,显色程度反映抗体量。 结果分析:测吸光度值,和标准曲线对比,判断抗体效价和活性。 三、其他辅助方法 免疫组织化学(IHC):看抗体和组织抗原的结合情况,评估特异性。 交叉反应性测试:验证抗体是否和非目标抗原结合,避免假阳性。 四、注意事项 实验条件:温度、pH值等要严格控制,避免影响结果。 抗体保存:避免反复冻融,防止活性丧失。
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