遇到标准曲线重复性不合格别急,咱们一步步来排查和解决。核心是从配制、操作、数据处理三方面入手,针对性调整就能有效改善。 一、先检查标准溶液配制 标准品质量:确认是否纯度高、稳定性好,避免降解或污染。 浓度范围:覆盖待测样品浓度,通常设5-7个点(低、中、高浓度)。 配制操作:用校准过的移液器,严格按规程操作,避免交叉污染。 二、再优化仪器操作 仪器预热:充分预热15-30分钟,确保光源和检测器稳定。 波长选择:根据待测物特性选波长,提高灵敏度。 比色皿使用:选石英或玻璃比色皿,保持清洁和方向一致。 参比溶液:用空白溶液调零,消除背景干扰。 三、最后规范数据处理 重复测量:每个标准溶液测3-5次,取平均值。 数据记录:准确记录浓度和吸光度,确保可追溯。 基质匹配:标准系列与待测样品基体尽量一致,减少干扰。 干扰排查:用标准加入曲线或Youden曲线检查基体干扰。 四、其他常见问题处理 移液不准:定期校准移液器,规范操作。 洗板不:增加洗涤次数,确保孔板排干。 反应液蒸发:用封板膜密封孔板。 曲线拟合:尝试对数-对数或4/5参数逻辑拟合。
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