进口分装ELISA试剂盒实验的优点来看它是一门在免疫学检验中非常受欢迎的,我们之前一直在强调的是一些正确的实验步骤与注意事项,那么elisa实验还有注意的一个重点就是相关条件的选择,那今天大家着重来看elisa实验要注意!条件选择“四”包括。 *,固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。 第二,包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。 第三,酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 第四,酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。进口分装ELISA试剂盒底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒 ,英文名: LPL ELISA Kit 小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒 ,英文名: Lp-PL-A2 ELISA Kit 小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA试剂盒 ,英文名: Lp-PLA2 ELISA Kit 小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 ,英文名: Lp-α ELISA Kit 小鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA试剂盒 ,英文名: RANTES/CCL5 ELISA Kit 小鼠整合素αM(Itgam/CD11b)ELISA试剂盒 ,英文名: Itgam/CD11b ELISA Kit 小鼠整合素α-IIb(Itga2b/CD41)ELISA试剂盒 ,英文名: Itga2b/CD41 ELISA Kit 小鼠整合素α5(Itgax/CD11c)ELISA试剂盒 ,英文名: Itgax/CD11c ELISA Kit 小鼠长停滞特异性基因产物6(gas-6)ELISA试剂盒 ,英文名: gas-6 ELISA Kit 小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA试剂盒 ,英文名: MUC7 ELISA Kit 进口分装ELISA试剂盒 |