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小鼠ELISA试剂盒实验要做好两大优化 |
点击次数:558 更新时间:2017-05-24 |
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小鼠ELISA试剂盒加样的优化: 也可在板孔中参加稀释液,再在其参加血清标本,然后在微型震动器上震动1分钟以保证混和。 在这一过程中,通常情况下有三次加样,它们分别是加标本,加酶物,加底物。 通常说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超越一星期测定的需低温冰存。 冻住血清融解后,蛋白质部分浓缩,分布不均,应充沛混匀宜轻缓,防止气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上激烈振动。 制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只需待血清天然凝结后即可获得。 小鼠ELISA试剂盒包被条件的优化: 包被抗原的挑选:可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。 包被浓度的挑选:包被的zui适浓度随固相载体和包被物的性质改变,通常蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml,要清晰对于特定包被抗原的zui适包被浓度需求经过试验来断定。 包被液的挑选:通常常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液,假如包被的抗原在碱性条件下不稳定的话,也能够运用pH7.2的磷酸盐缓冲液。 包被温度的挑选:通常是4-8度条件下放置一个黑夜或者37度保温2小时,我们激烈建议4-8度条件下包被,有利于蛋白活性的坚持。 小鼠ELISA试剂盒实验小分子抗原比方多肽以及一些小分子有机化合物,因为分子量太小,通常难于直接吸附在酶标板上,通常都先使其与无关蛋白质,比方BSA等偶联,偶联物吸附于固相载体上。 |
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