人ELISA试剂盒认为需要重视的步骤
人ELISA试剂盒ELISA法特异性强 ,敏感性高 ,操作快速简便 ,因而是免疫学检验中zui为常用的方法 ,也是我们基层医院检验科免疫学检验的主要技术手段。我科乙肝五项、丙肝抗体、HIV抗体、梅毒抗体等均用ELISA法检测。其中HBsAg的检测量zui大。我们在实际工作中体会到ELISA法检测的全程质量控制很重要 ,的试剂、良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。现将我们平时在操作中认为需要重视的步骤及遇到的一些问题报告如下 :
人ELISA试剂盒标本的采集和保存
一般在医学免疫检验中均以血清作为检测标本。血清标本可按常规方法采集 ,应注意避免溶血 ,因红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质 ,以HRP为标记的 ELISA测定中 ,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。标本储存时间过长,IgG可聚合成多聚体 ,在间接ELISA测定中导致本底过深 ,甚至造成假阳性。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过1周测定的需低温冰存。
人ELISA试剂盒试剂的准备
按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水 ,包括用于洗涤的 ,应为新鲜的和高质量的。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。 |
