【中文名称】：山羊粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）ELISA 试剂盒 【产品规格】：96T/48T。 【保存条件】：2-8℃低温保存 【保质期】：6个月，所有试剂盒均提供批次。 一、检测原理 用纯化的山羊GM-CSF特异性捕获抗体包被微孔板，形成固相抗体。往微孔中依次加入待测样本、梯度浓度标准品，再加入HRP标记的GM-CSF检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体"免疫复合物。经过洗涤后加入TMB底物显色，TMB在过氧化物酶催化下转化为蓝色，在酸终止液作用下最终变为黄色。颜色深浅与样本中GM-CSF浓度呈正相关，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线即可换算得到样本中GM-CSF的实际浓度。 二、试剂盒组成 
标准化操作步骤 从铝箔袋中取出所需数量的板条，剩余未使用板条立即放回自封袋，密封后2-8℃干燥保存。 设置空白孔、系列标准品孔、待测样本孔：标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL，样本最终稀释倍数为5倍；空白孔不加任何液体。 除空白孔外，所有孔中每孔加入HRP标记检测抗体100μL，用封板膜密封反应孔，37℃恒温箱中温育60分钟。 弃去孔内所有液体，在吸水纸上充分拍干，每孔加满稀释后的洗涤液，静置1分钟后甩去液体，再次拍干，重复洗板5次；使用自动洗板机时，每孔注入洗液350μL，浸泡30秒后弃液，洗板5次。 每孔依次加入底物A液、底物B液各50μL，轻轻混匀，37℃避光环境下孵育15分钟。 每孔加入终止液50μL，15分钟内用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值。 结果计算 以标准品浓度为横坐标，对应OD值为纵坐标，绘制标准曲线，通过五参数逻辑回归拟合得到曲线方程。将样本的OD值代入方程，计算出样本的初始浓度，再乘以稀释倍数5，即可得到山羊GM-CSF的实际最终浓度。 试剂盒性能指标 准确性：标准品线性回归与预期浓度的相关系数R值≥0.9900。 灵敏度：检测浓度≤15pg/mL，覆盖山羊生理病理状态下GM-CSF的常见表达范围。 特异性：与山羊其他相关细胞因子无明显交叉反应，特异性强。 重复性：板内变异系数＜10%，板间变异系数＜15%，结果稳定可靠。 有效期：2-8℃避光防潮条件下保存，有效期6个月。 关键注意事项 严格按照说明书中标明的时间、加液量和顺序进行温育操作，随意延长或缩短孵育时间会直接导致结果偏差。 吸取不同样本、试剂时必须更换一次性枪头，避免交叉污染；不同批号的试剂禁止混用。 底物B液对光敏感，避免长时间暴露于强光下；显色剂需保持无色，出现明显蓝色时禁止使用。 终止液为稀硫酸溶液，具有腐蚀性，操作时佩戴手套避免直接接触皮肤，实验结束后洗手。 若样本中GM-CSF浓度过高，建议做梯度稀释复检，避免钩状效应导致假阴性结果。 本试剂盒仅用于山羊相关科研实验，不得用于动物临床诊断或人体检测，违规操作后果由实验者自行承担。
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