小鼠胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL7)检测试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同3。 8. 洗涤:操作同5。 9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。 Southern级细菌(G-)DNAout(见关联产品) 百万碱基级细菌(G+)DNAout(见关联产品) 百万碱基级细菌(G-)DNAout(见关联产品) 大提柱式土壤DNAout 大提柱式细菌DNAout 大提柱式细菌DNAout 分枝杆菌DNAout 土壤DNAout 细菌DNAout(250次) 细菌DNAout(50次) 一步式细菌DNAout 柱式分枝杆菌DNAout 柱式水样DNAout 柱式土壤DNAout 柱式微生物基因组DNAout 柱式细菌DNAout(50次) 病毒DNA提取 96孔板病毒DNAout(离心法)(1次) 96孔板病毒DNAout(离心法)(5次) 96孔板病毒DNAout(真空法)(见关联产品) M13噬菌体单链基因组DNAout(见关联产品) λ噬菌体DNAout(见关联产品) 一管式病毒DNA-RNAout 一管式病毒DNAout(200次) 一管式病毒DNAout(50次) 柱式病毒DNAout 经典法质粒DNA提取
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