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鹦鹉喙羽病病毒PCR检测试剂盒​反应五要素

点击次数:332 更新时间:2022-10-25

鹦鹉喙羽病病毒PCR检测试剂盒反应五要素:


参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+


引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:


①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。


②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。


③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。


④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。


⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。


⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。


⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。


引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

异质性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)ELISA试剂盒

异质性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)ELISA试剂盒

异质性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)ELISA试剂盒

异质性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)ELISA试剂盒

异质性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)ELISA试剂盒

异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)ELISA试剂盒

异质核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1)ELISA试剂盒

异锁链素(IDES)ELISA试剂盒

异柠檬酸脱氢酶(ICD)ELISA试剂盒

异丙肾上腺素(iso-Hyd)ELISA试剂盒

乙酰乙酸(ACAC)ELISA试剂盒

乙酰肝素酶(HPA)ELISA试剂盒

乙醛脱氢酶18家族成员A1(ALDH18A1)ELISA试剂盒

乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒

乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)ELISA试剂盒

乙醇脱氢酶(ADH)ELISA试剂盒


 

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