PrimaCell™大鼠脑微血管内皮细胞试剂盒操作要点:
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。 2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。 4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。 5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。 6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 胰腺星状细胞 胎盘羊膜细胞 胎盘滋养层细胞 胎盘绒毛膜细胞 脐带单核细胞 胎儿表皮角化细胞 胎儿真皮成纤维细胞 脐静脉内皮细胞 脐动脉内皮细胞 脐静脉平滑肌细胞 脐动脉平滑肌细胞 子宫内膜上皮细胞 子宫平滑肌细胞 子宫成纤维细胞 卵巢上皮细胞 卵巢成纤维细胞 卵巢微血管内皮细胞 乳腺上皮细胞 乳腺成纤维细胞 胰岛β细胞 甲状腺滤泡上皮细胞
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