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小鼠多效生长因子ELISA 检测试剂盒内容 |
点击次数:2546 更新时间:2012-09-04 |
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小鼠多效生长因子ELISA检测试剂盒内容 试验原理: PTN试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知PTN浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将PTN和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中PTN的浓度呈比例关系。 试剂盒内容及其配制 小鼠多效生长因子ELISA检测试剂盒 试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制 96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型 塑料膜板盖1块半块即用型 标准品:1600pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀 空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型 标准品稀释缓冲液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型 生物素标记的抗PTN抗体1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 亲和链酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型 洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释 底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型 自备材料 蒸馏水。 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 振荡器及磁力搅拌器等。 安全性小鼠多效生长因子ELISA检测试剂盒 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 操作注意事项 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 样品收集、处理及保存方法 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 试剂的准备 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行: 1600pg/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 800pg/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 400pg/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 200pg/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 100pg/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 50pg/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 0pg/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。小鼠多效生长因子ELISA检测试剂盒 抗ENA抗体金标法血清20T/40T 抗核抗体(ANA)金标法血清20T/40T 抗ds-DNA抗体金标法血清24T/48T 抗SS-DNA抗体金标法血清20T/40T 抗SM抗体金标法血清20T/40T 抗组蛋白抗体金标法血清20T/40T 类风湿因子(IgA\IgM\IgG)金标法血清20T/40T 抗“O”试剂金标法血清20T/40T 抗精子抗体(IgA\IgM\IgG)金标法血清24T/48T 抗心磷脂抗体(IgA\IgM\IgG)金标法血清24T/48T 抗子宫内膜抗体(IgG\IgM)金标法血清24T/48T 小鼠多效生长因子ELISA检测试剂盒 |
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