豚鼠干扰素-γ（IFN-γ）ELISA 检测试剂盒操作 试剂盒内容及其配制 | 试剂盒成份（2-8℃保存） | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 | | 96/48人份酶标板 | 1块板（96T） | 半块板（48T） | 即用型 | | 塑料膜板盖 | 1块 | 半块 | 即用型 | | 标准品：800pg/ml | 1瓶（0.6ml） | 1瓶（0.3ml） | 按说明书进行稀稀 | | 空白对照 | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） | 即用型 | | 标准品稀释缓冲液 | 1瓶（5ml） | 1瓶（2.5ml） | 即用型 | | 生物素标记的抗IFN-γ抗体 | 1瓶（6ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 | | 亲和链酶素-HRP | 1瓶（10ml） | 1瓶（5.0ml） | 即用型 | | 洗涤缓冲液 | 1瓶（20ml） | 1瓶（10ml） | 按说明书进行稀释 | | 底物A | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 | | 底物B | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 | | 终止液 | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
操作注意豚鼠干扰素-γ（IFN-γ）ELISA 检测试剂盒事项 1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法 1、 血清-----操作过程豚鼠干扰素-γ（IFN-γ）ELISA 检测试剂盒中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备 1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行： | 800 pg/ml | （6号标准品） | 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 | | 400 pg/ml | （5号标准品） | 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 | | 200 pg/ml | （4号标准品） | 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 | | 100 pg/ml | （3号标准品） | 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 | | 50 pg/ml | （2号标准品） | 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 | | 25 pg/ml | （1号标准品） | 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 | | 0 pg/ml | （空白对照） | 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 |
2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。
操作步骤 1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。 2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。 3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、豚鼠干扰素-γ（IFN-γ）ELISA 检测试剂盒加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。 4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。 5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。 6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。 7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。 8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。 9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。大鼠载脂蛋白H（Apo-H）ELISA试剂盒
大鼠白介素2受体（IL-2R）ELISA试剂盒
大鼠肾上腺髓质素（ADM）ELISA试剂盒
大鼠β内啡肽受体（β-EPR）ELISA试剂盒
大鼠钙/钙调素依赖性蛋白激酶2（CAMK 2）ELISA试剂盒
大鼠肝脂酶（HL）ELISA试剂盒
大鼠烟碱型乙酰胆碱受体（N-AChR）ELISA试剂盒
大鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体（M-AChR）ELISA试剂盒
大鼠活化蛋白C（APC）ELISA试剂盒
大鼠甘丙肽/甘丙素（GAL）ELISA试剂盒
大鼠α葡萄糖苷酶（a-Glu）ELISA试剂盒
大鼠破骨细胞分化因子（ODF）ELISA试剂盒
大鼠Toll样受体9（TLR-9/CD289）ELISA试剂盒
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