小鼠突触囊泡蛋白Ⅰ(SYT1)ELISA试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。 脊髓小脑共济失调2型蛋白抗体 芳香基硫酸酯酶H抗体 溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体 载脂蛋白1抗体 突触融合结合蛋白6抗体 精氨酸酶1抗体 腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白7抗体 磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体 Na+/K+-ATPase α1 钠钾ATP酶α1抗体 肌动蛋白样蛋白6B抗体 脊髓小脑共济失调蛋白7抗体 磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体 β淀粉样前体蛋白结合蛋白1抗体（X11α） 载脂蛋白E抗体 甲胎蛋白AFP抗体 阴离子交换蛋白2抗体 铁调节蛋白1抗体 三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗体 载脂蛋白J抗体 载脂蛋白H抗体 二磷酸腺苷核糖基转移酶4抗体 AKIRIN2蛋白抗体 ADP核糖基化样因子8B抗体 三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗体 AKIRIN1蛋白抗体
|
