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牛(catlle)白细胞介素-2(IL-2)操作步骤

点击次数:1425 更新时间:2012-05-24

 牛(catlle)白细胞介素-2(IL-2)操作步骤

操 作 步 骤

1.取出酶标板,设空白孔,依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中(空白孔视为0号标准品,用医用蒸馏水替代)

2、分别标记样品编号,加入100μl的稀释样品于空白微孔中(不同的样本采用不同的吸头)。

3、将酶标板置于37℃温育30分钟;

4、将酶标板板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体;牛(catlle)白细胞介素-2(IL-2)

5、每个孔中加满应用洗涤液后,轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。

6、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。

7、在标准品孔和样品孔中加入100μl的酶标偶合溶液。

8、将96孔板置于37℃温育30分钟。

9、将酶标板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体。牛(catlle)白细胞介素-2(IL-2)

10、每个孔中再次加满洗涤应用液后,室温轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。

11、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。

12、在每个孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。轻轻振荡混匀。(A液、B液采用不同的吸头加样)

13、将酶标板置于37℃避光温育反应15分钟。

14、每个微孔中加入50μl的终止液,轻轻振荡混匀。

15、在酶标仪上,450nm处测定OD; 显色后,15分钟内进行测定。

16、根据制备的标准曲线,计算样本含量牛(catlle)白细胞介素-2(IL-2)

 

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