九、结果判定
结果判定有两种方法,粗略判定可用第1种方法,而定量判定用第2种方法。注意样本吸光值与其所含黄曲霉毒素B1成负相关。
1、用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围(ppb)。假设样本1的吸光度值为0.659,样本2的吸光度值为1.525,标准液吸光度值分别是:0ppb为2.101;0.05ppb为1.738;0.15ppb为1.313;0.45ppb为0.831;1.35ppb为0.469;4.05ppb为0.262。则样本1的浓度范围是0.45ppb~1.35ppb;样本2的浓度范围是0.05ppb~0.15ppb 再乘以其对应的稀释倍数即可得出样本中黄曲霉毒素M1的浓度范围。
2、定量分析
十、检测方法灵敏度、准确度、精密度
试剂盒检测下限:
0.05ppb
回收率:
牛奶:90±15%
奶粉:85±15%
精密度:
试剂盒的变异系数均小于10%
十一、注意事项
1、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温(20~25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3、每加一种试剂前需将其摇匀。
4、反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。
5、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6、储存条件
保存试剂盒于2~8℃,不要冷冻,将不用的酶标板微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。
7、试剂变质的迹象
发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。
8、在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为15~20min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到30min(或更长)。反之,则减短反应时间。
9、浓缩洗涤液如有结晶属正常现象,请加热溶解后使用。
10、该试剂盒*反应温度为25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。
十二、贮藏条件及保存期
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。
保存期:该产品有效期为12个月。