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红细胞裂解液使用说明 |
点击次数:3424 更新时间:2011-10-11 |
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一、组织细胞样品: 1.新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液; 2.从4℃冰箱中取出ELS裂解液,按1:3-5的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入3-5ml裂解液),轻轻吹打混匀; 3.800-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清液; 4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次; 5.如裂解不*可重复步骤2和3; 6.重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液中进行。 二、血细胞: 1.新鲜抗凝血,离心弃去上清液; 2.取出4℃冰箱预冷的ELS裂解液,按1:6-10的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入6-10ml裂解液),轻轻吹打混匀; 3.800-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清液; 4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次; 5.如裂解不*可重复步骤2和3; 6.重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液进行。 |
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