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血清培养基的常见问题

点击次数:3267 更新时间:2011-09-16

血清培养基常见问题:

1. 血清的成份可能有几百种之多,目前对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难。

2. 对大多数细胞,在体内状态,血清不是它们接触的生理学液体,只是在损伤愈合以及血液凝固过程中才接触血清,因此使用血清有可能改变某种细胞在体内的正常状态,血清可能促进某些细胞的生长(成纤维细胞)同时抑制另一类细胞生长(表皮细胞)。

3. 血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌毒素等都会影响细胞生长,甚至造成细胞死亡。

4. 取材中可能带入支原体、病毒,对细胞产生潜在影响,可能导致实验失败或实验结果不可靠性。

5. 动物个体不同,血清产地、批号不同,每批质量差异甚大,其成分不能保持一致。

6. 对大多数细胞,在体内状态,血清不是它们接触的生理学液体,只是在损伤愈合以及血液凝固过程中才接触血清,因此使用血清有可能改变某种细胞在体内的正常状态,血清可能促进某些细胞的生长(成纤维细胞)同时抑制另一类细胞生长(表皮细胞)。

7. 大规模中,血清来源越来越困难,价格昂贵,是构成动物细胞培养对成本的主要部分之一。

血清的质量标准

血清质量高低取决于两方面因素:一是取材对象,二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在的出生天数之内,取材过程应严格按照操作规程执行,制备出的血清要经过严格的质量鉴定。WHO公布的《用动物细胞体外培养生物制品规程》中的要求:

1. 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。

2. 证明所用牛血清中不含对所疫苗病毒的抑制物。

3. 血清要通过滤膜过滤除菌,保证无菌。

4. 对细胞有良好的支持繁殖作用。

5. 无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染,有些国家要求无细菌噬菌体污染。

我国在对牛血清的质量2000年版《中国生物制品主要原辅料质控标准》中提出比较严格的标准要求。包括蛋白质含量,细菌、真菌、支原体、牛病毒、大肠杆菌噬菌体、细菌内毒素,支持细胞增殖检查。

 

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