本公司α-银环蛇毒素（α-BGT）ELISA试剂盒使用说明

本试剂盒仅供研究使用。
药品名称：
通用名：人α-银环蛇毒素（α-BGT）酶联免疫分析试剂盒
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中α-银环蛇毒素（α-BGT）含量。
实验原理
本试剂盒应用间接法测定标本中人α-银环蛇毒素（α-BGT）水平。用纯化的人α-银环蛇毒素（α-BGT）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的α-银环蛇毒素（α-BGT）标准品和未知浓度的α-BGT待检样品，温育后，加入生物素标记的抗IgG抗体，再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的α-银环蛇毒素（α-BGT）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人α-银环蛇毒素（α-BGT）浓度。
标本要求
1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
操作步骤
1. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl，在样本反应孔中先加入待测样品10μl再加入样品稀释液40μl（样品zui终稀释度为5倍），盖上封板膜，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。
3. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复4次，拍干。
5. 加生物素标记的抗-IgG抗体：每孔加入生物素标记的抗-IgG抗体50μl。37℃温育30分钟
6. 洗涤：操作同4。
7. 加链霉亲和素-HRP：每孔加入50μl的链酶亲和素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
8. 洗涤：操作同4。
9. 显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。