一、问：用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？ 答：关于漂移问题： 1.温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定 2.流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等 3.柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡 关于快速变化问题 1.流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定 2.泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。 3.流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合 二、问：液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？ 答：1.筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。 2.存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子 三、问：HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法 答：1.样品量不足，解决办法为增加样品量 医.学教育网搜集整理 2.样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 3.样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器 4.检测器衰减太多。调整衰减即可。 5.检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数 6.检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗。 7.检测池中有气泡。解决办法为排气。 8.记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。 9.流动相流量不合适。调整流速即可。 10.检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。 四、问：做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在？如何解决？ 答：原因可能有： 1.泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理； 2.比例阀失效，更换比例阀即可； 3.泵密封垫损坏，更换密封垫即可； 4.溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法； 5.系统检漏，找出漏点，密封即可； 6.梯度洗脱，这时压力波动是正常的。 |
