论坛上关于ELISA试剂盒批发的讨论帖子非常多,今天也发表一下自己的一些看法,对ELISA的见解有不对的地方,希望指正或者直接拍砖。如何灵活应用ELISA这个检测方法以及如何去挑选ELISA试剂盒。ELISA这个方法的原理,大家都很清楚,网上的资料一大堆。可真正用起来的时候,有时候就有点犯糊涂,我谈一下自己的理解。 ELISA试剂盒检测方法简述: 间接法测抗体:将特异性抗原包被在固相载体上,形成固相抗原,加入待检标本(含相应抗体),其中抗体与固相抗原形成抗原-抗体复合物,再加入酶标记的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体,亦称二抗),与上述抗原-抗体复合物结合。此时加入底物,复合物上的酶则催化底物而显色。
双抗体夹心法测抗原:将已知的特异性抗体包被在固相载体上,形成固相抗体,加入待检标本(含相应抗原),抗原与固相抗体结合成复合物,再加入特异性酶标抗体,使之与已形成的抗原-抗体复合物结合,当加入与酶相应的底物时,酶催化底而显色,根据颜色的有无和颜色的深浅对待测抗原进行定性和定量。 |