我们今天所说的封闭是进口原装ELISA试剂盒实验中的一个步骤,而封闭的重要性是在于实验模式的,今天和您一起重点来看这个问题。 抗原或抗体包被时所用的浓度较低,吸收后固相载体表面尚有未被占据的空隙,封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥在ELISA其后的步骤中干扰物质的再吸附。 封闭剂: 1. zui常用的是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白。 2. 也有用10%的小牛血清或1%明胶作为封闭剂的。 3. 脱脂奶粉也是一种良好的封闭剂,其zui大的特点是价廉,可以高浓度使用(5%)。 4. 高质量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作封闭剂使用,但由于奶粉的成份复杂,而且封闭后的载体不易长期保存,因此在试剂盒的制备中较少应用。 总结:并非所有的ELISA固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高。 1. 一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤*,不经封闭也可得到满意的结果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封闭剂的作用。 2. 进口原装ELISA试剂盒在间接法测定中,封闭一般是不可少的。 磷酸化星形胶质细胞PEA15IgG 人肌酸激酶(CK) 磷酸化雄激素受体IgG 人肌生成素(MYOG) 磷酸化雄激素受体IgG 人肌球蛋白重链(MHC) 磷酸化血管扩张刺激磷蛋白IgG 人肌球蛋白轻链激酶(MLCK) 磷酸化血管扩张刺激磷蛋白IgG 人肌球蛋白轻链(MLC) 磷酸化血管内皮生长因子受体2IgG 人肌球蛋白(MYS) 磷酸化血管内皮生长因子受体2IgG 人肌腱蛋白R(TN-R) 磷酸化血管内皮生长因子受体2IgG 人肌红蛋白(MYO/MB) 磷酸化血管内皮生长因子受体2IgG 人肌钙蛋白T(Tn-T) 磷酸化血管生成素受体2IgG 人肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ) 磷酸化血管生成素受体2IgG 人活化素A(ACV-A) 进口原装ELISA试剂盒 |