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小鼠ELISA试剂盒的三个阶段

点击次数:444 更新时间:2017-11-30

1. 小鼠ELISA试剂盒潜伏期(latent phase)  

接种 经过 悬浮期(细胞质回缩,胞体呈圆球形) 贴壁。

初代培养细胞 经过 10~24小时或更多时间。

连续细胞系和癌细胞系 经过 10~30分钟 贴附。

贴附现象是一个非常复杂和受多种因素的影响。

影响细胞贴附:底物表面不干净,影响细胞贴附。

利于细胞贴附:底物表面带有阳性物质与特殊物质:

纤粘连蛋白(fibronectin FN)、

细胞表面蛋白(cell surface proteinCSP)

这些物质有的存在与细胞表面,有的来自血清。

潜伏期特点:

长短与细胞接种密度、种类、使用的培养基性质有关 

(1)细胞贴附后进入潜伏期,细胞无增殖。少见分裂相,细胞有运动活动。

(2)初代培养 细胞潜伏期约为24~96小时或更长,

连续细胞系和肿瘤细胞潜伏期约6~24小时。

(3)细胞接种密度大潜伏期短 

(4)细胞出现分裂相增多时,标志细胞进入指数增生期。

2.指数增生期(logarithmic growth phase):

特点:细胞增殖zui旺盛阶段,分裂相增多。

细胞分裂指数(mitotie index MI) :

表示每1000个细胞中的分裂相数。

条件:分裂相数与细胞种类、培养成分、pH培养箱温度有关。 

细胞分裂指数: 

初代细胞:在0.1%~0.5%之间% ,

连续分裂细胞和肿瘤细胞:3 ~5%。 

指数增生期是作为细胞一代活力的时期,是进行实验和zui主要的阶段。

指数增生期持续3~5天,细胞数量增多后生长空间变小,细胞相互接触可连接成片。 

正常细胞:细胞相互接触能抑制细胞运动,这种现象称为接触抑制(contact inhibition)。 

肿瘤细胞:没有这种现象,可作为区别正常与肿瘤细胞的标志之一。当肿瘤细胞达到一定密度后向三维空间发展,使细胞发生堆积(piled up)。 

由于细胞不断增殖分裂,细胞数量持续增多,培养液的营养成分减少,代谢产物增多,细胞受营养的枯竭和代谢物的影响,则发生密度抑制(Density inhibition),导致细胞分裂停止。 

3.小鼠ELISA试剂盒停滞期(stagnate phase) 

细胞量和密度达到饱和,细胞停滞增殖。表明细胞进入到停滞期,细胞数量持平,也称为平顶期(plateau)。 

特点:细胞不增殖,有代谢活动。培养液中的营养已逐渐耗尽,代谢产物积累增多,pH降低,此时需要传代,否则细胞将会中毒,发生形态改变,细胞会从底物脱落死亡。 

注意:

传代过晚将影响下一代细胞的生长,至少要再传 1~2代 ,通过换液淘汰死细胞和受损较轻的细胞。待细胞全部恢复后再用。
阿托品;龙葵碱;颠茄碱    51-55-8    :    Atropine;DL-Tropyl tropate    英文名称:
阿魏酸;4-羟基3-甲氧基肉桂酸;咖啡酸-3-甲醚    537-98-4    :    Ferulic acid;3-Methoxy-4-hydroxy cinnaMic acid;Caffeic acid 3-Methyl ether;3-(4-Hydroxy-3-Methoxyphenyl)-2-propenoic acid    英文名称:
阿扎红霉素A    76801-85-9    :    AzaerythroMycin A;9-Deoxo-9a-aza-9a-hoMoerythroMycin A    英文名称:
安普罗铵    121-25-5    :    AMproliuM    英文名称:
安赛蜜    55589-62-3    :    AcesulfaMe PotassiuM    英文名称:
安替比林;;;二甲基苯基吡唑酮    60-80-0    :    Antipyrine;Phenyl diMethylpyrazolone;1,2-Dihydro-1,5-diMethyl-2-phenyl-3H-pyrazol-3-one;2,3-DiMethyl-1-phenyl-3-pyrazolin-5-one    英文名称:
安替福民 ;次氯酸钠    7681-52-9    :    Sodium hypochlorite    英文名称:
小鼠ELISA试剂盒

 

 

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