Western免疫印迹法实验操作步骤

进口原装ELISA试剂盒实验材料：蛋白质样品
试剂、试剂盒：    裂解液PBSG 250考马斯亮蓝溶液NaCl SDS上样缓冲液电泳缓冲液转移缓冲液丽春红染液封闭液TBSTTBS洗脱抗体缓冲液显影液定影液抗体化学发光试剂
仪器、耗材：   高压锅玻璃匀浆器高速离心机分光光度仪-20℃低温冰箱垂直板电泳转移装置恒温水浴摇床多用脱色摇床
实验步骤    
一、操作步骤：

1. 进口原装ELISA试剂盒蛋白样品制备
（1） 单层贴壁细胞总蛋白的提取：

① 倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。

② 每瓶细胞加3ml 4℃预冷的PBS（0.01 M pH7.2～7.3）。平放轻轻摇动1 min 洗涤细胞，然后弃去洗液。重复以上操作两次，共洗细胞三次以洗去培养液。进口原装ELISA试剂盒将PBS弃净后把培养瓶置于冰上。