细菌纯种分离的方法有两种：稀释平板法。ELISA试剂盒 （一）稀释平板分离法 １．取样 用无菌锥形瓶到现场取一定量的活性污泥或土壤或湖水，迅速带回实验室。 ２．稀释水样 工作前，用镊子取出一块酒精棉球擦手、镊子以及工作台，待工作台干净后，点燃酒精灯。将１瓶90ｍ1和5管9ｍ1的无菌水排列好，按10-1、10-2、10-3、10-4、10-5及10-6依次编号。在无菌操作条件下，用10ｍ1的无菌移液管吸取10ｍ1水样 （或其他样品10ｇ）置于*瓶90ｍ1无菌水 （内含玻璃珠）中，将移液管吹洗３次，用手摇10分钟将颗粒状样品打散。即为10-1浓度的菌液。用1ｍ1无菌移液管吸取1ｍ1的10-1浓度的菌液于一管9ｍ1无菌水中，将移液管吹洗3次，摇匀即为10-2浓度菌液。用同样的方法依次稀释到10-6。ELISA试剂盒 ３．平板的制作 取10套无菌培养皿编号，10-4、10-5、10-6各3个，另1个为空气对照。取1支1ｍ1无菌移液管从浓度小的10-6菌液开始，以10-6、10-5、10-4为序分别吸取0.5ｍ1菌液于相应编号的培养皿内 （注：每次吸取前，用移液管在菌液中吹吸使菌液充分混匀）。或者直接用微量移液枪移取0.5ｍｌ菌液，每移一次换一个枪头，移取液体前，用70％乙醇对进入试管的枪体进行擦拭消毒。加热融化已灭菌的培养基，当培养基冷却至45℃左右时，进行无菌操作倒平板。倒入培养基后将培养皿平放在桌上，顺时针和反时针来回转动培养皿，使培养基和菌液充分混匀，冷凝后即成平板，倒置于30℃恒温箱中培养48小时，然后观察结果注：若在无菌室内操作。取 “对照”的无菌培养皿，待平板待凝固后，打开皿盖10分钟后盖上皿盖，倒置30℃箱中培养，48小时后观察结果。ELISA试剂盒 |
