通过在支持物(如盖玻片)上培养贴壁细胞，可以应用抗体检测细胞表面抗原的表达或进行酶细胞化学以及免疫细胞化学检测。该方法的优点是细胞贴壁牢固，能够维持细胞生长时的状态。 一、材料 1．待培养细胞。 2．试剂75％乙醇、蒸馏水、培养液。 3．器具盖玻片、盖玻片镊、6孔培养板、培养皿、纱布。 二、操作步骤 1．用盖玻片镊将盖玻片从75％乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布。 2．将盖玻片轻轻放人6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2～3片)。 3．将6孔培养板或培养皿放在距离紫外灯直射范围内20～30cm处照射2～3h。 4．将经过计数的细胞悬浮液移入6孔培养板或培养皿中，使盖玻片*浸在培养液中。 5．将6孔培养板或培养皿中放在细胞培养箱内培养2～3d，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2／3面积时，将6孔培养板或培养皿取出，用盖玻片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 三、注意事项 1．玻片培养法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法。 2．所使用的盖玻片应为玻璃，并经过铬酸洗液处理。 3．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在O．5％多聚赖氨酸溶液中浸泡5～10min并自然晾干。 |
