凋亡相关基因 （一）c-myc基因：c-myc基因是一种原癌基因，其表达能促进细胞增殖，也能诱导细胞凋亡。c-myc信号系统被激活以后，如果培养体系中有足够的生长因子持续作用，则细胞增殖分裂，否则便诱导细胞发生凋亡[10]。培养基中血清浓度降低时，Fb是否发生凋亡及细胞亡亡率均取决于c-myc蛋白表达水平，细胞凋亡率与c-myc表达水平呈正相关[11]。 1．培养Fb的c-my基因的表达：Trojanowska等比较培养的硬皮病皮损及正常人皮肤Fb的c-myc基因的表达，发现血清浓度低时（1%血清），硬皮病皮损Fb的c-myc表达水平是正常的Fb的2.5～3倍，同时硬皮病Fb的增生也较正常Fb快。不过加入10%新鲜血清后，c-myc的增高就不明显[12]。Feghali等[13]检测培养的SSc皮损区、非皮损区及正常皮肤Fb的c-myc的表达，发现SSc皮损Fb的c-myc mRNA水平较其它Fb增高1.5～5.6倍，作者认为c-myc表达增高也许是SSc患者Fb活化的指标。 2．外周血淋巴细胞c-myc的表达：Kahan等[14]用RNA杂交技术检测17例皮肤弥漫性系统性硬皮病（deSSc）患者及8例正常人外周血淋巴细胞c-myc的表达，发现deSSc患者T淋巴细胞的c-myc水平明显高于正常对照（P＜0.02＝，且早期、活动期SSc患者T淋巴细胞的c-myc水平较非活动期高；B淋巴细胞的c-myc表达稍高于正常人，但差异无显著性。这表明SSc患者体内T淋巴细胞的活化在疾病的发生中可能有重要作用。 （二）bcl-2基因：bcl-2也是一种原癌基因，编码产物分子量为26000的蛋白分子，在正常细胞的激活和发育过程中表达，而在成熟的或走向凋亡的细胞中呈低表达或不表达[1]，bcl-2的表达可抑制许多细胞的凋亡，延长细胞的存活期[10，15]。Wang等[16]研究培养的人及鼠Fb，发现衰老的Fb的（58代）能耐受血清减少诱导的细胞凋亡，这与其持续表达高于水平bcl-2相关。Nambu等[17]用免疫组化疗法检测25例胶原血管疾病（9例类风湿性关节炎，9例进行性SSc，4例多发性肌炎/皮肌炎，2例干燥综合征，1例SLE）及10例特发性间质性肺炎bcl-2的表达，发现bcl-2蛋白的表达主要在浸润肺泡间质的T淋巴细胞及淋巴滤泡皮质的B淋巴细胞。在胶原血管性疾病中，bcl-2蛋白在T淋巴细胞的表达水平与肺泡内的淋巴细胞浸润数目紧密相关。还有研究表明硬皮病患者外周血淋巴细胞bcl-2有过度的表达[2]。 （三）Fas系统：Fas系统又称作APO-1，属肿瘤坏死因子受体/神经生长因子受体超家族成员。1993年人白细胞分型会议统一命名为CD95。Fas基因编码产物为分子量45000的跨膜蛋白，较广泛地分布于多种类型细胞，包括胸腺细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞、内皮细胞、上皮细胞以及皮肤角质形成细胞等。Fas蛋白与Fas配体组成Fas系统，二者的结合导致靶细胞走向凋亡。Fas配体主要表达于活化的T淋巴细胞表面，因此认为Fas系统的相互作用是细胞毒性T细胞（CTL）杀伤的主要分子机制[1，18]。Aringer等[2]用流式细胞仪检测硬皮病患者外周血淋巴细胞Fas的表达，患者与正常人无差异。然而Wetzig等[19]用夹心酶联免疫吸附法检测30例SSc及15例正常对照血清可溶性Fas水平发现SSc患者血清可溶性Fas水平明显高于正常对照，不过皮肤局限性系统性硬皮病（即肢端型，lcSSc）与dcSSc患者血清可溶性Fas水平比较无明显差异，可溶性Fas水平与炎症活动期也缺少相关性。 结语 硬皮病是一种多系统疾病，其病因及发病机理尚不清楚，近来的研究证实血管内皮损伤、免疫细胞活化、Fb增生、胶原合成过多等均参与其发病[20]。综合上述研究结果，早期内皮细胞凋亡也许是硬皮病患者内皮损伤的主要证据，内皮细胞的存在能影响Fb的生物学特性。凋亡相关基因bcl-2、c-myc及Fas系统在硬皮病均有异常表达，这也许是Fb、淋巴细胞活化的标志。但内皮细胞调亡对Fb生物特性的影响，以及凋亡相关基因异常表达与Fb胶原合成过多的关系还需要进一步探讨。因此，进一步研究细胞凋亡及凋亡相关基因的表达与硬皮病的关系，有助于进一步研究硬皮病的发病机理及探讨新的治疗手段。 |
